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蛋白純化系統(tǒng)的目的是將目標蛋白質從細胞裂解液的全部組分中分離出來,同時仍保留蛋白的生物學活性及化學完整性。蛋白質的分離和提純工作是一項艱巨而繁重的任務,需根據(jù)蛋白的特性選擇合適的純化方法來提高獲得的蛋白制品的純度。蛋白純化系統(tǒng)的原理為:不同蛋白質的氨基酸序列及空間結構不同,導致其在物理、化學、生物學等性質上存在差異,利用待分離蛋白質與其它蛋白質性質上的差異,即可以設計出一套合理的蛋白純化系統(tǒng)方案。
蛋白純化系統(tǒng)大致分為粗分離階段和精細純化階段兩個階段。粗分離階段主要將目的蛋白和其他細胞成分如RNA、DNA等分開,常用的方法為硫酸銨沉淀法。精細純化階段的目的是把目的蛋白與其他大小及理化性質接近的蛋白區(qū)分開來,常用的方法有:凝膠過濾層析、離子交換層析、疏水層析、親和層析等。
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