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IPTG溶液(50mg/ml)使用說明書 

【產(chǎn)品組成】

【保存條件】

-20℃,12個(gè)月

【產(chǎn)品概述】

  異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷簡稱IPTG，分子式為C₉H₁₈O₅S，分子量為238.30CAS號(hào)為367-93-1。IPTG是一種作用*的誘導(dǎo)劑，不易被細(xì)菌代謝而且很穩(wěn)定?；谶@個(gè)特性，當(dāng)攜帶帶lacZ基因載體DNA以lacZ缺失細(xì)胞為宿主進(jìn)行轉(zhuǎn)化時(shí)、或用M13噬菌體的載體DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí)，如果在平板培養(yǎng)基中加入X–gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互補(bǔ)性，可根據(jù)是否呈現(xiàn)藍(lán)/白色菌落(或噬菌斑)判斷出基因重組體。此外，它還可以作為具有l(wèi)ac或tac等啟動(dòng)子的表達(dá)載體的表達(dá)誘導(dǎo)物使用。

  IPTG溶液(50mg/ml)經(jīng)過濾除菌，一般工作濃度為1mM，主要用于誘導(dǎo)外源基因的表達(dá)，也用于原核表達(dá)系統(tǒng)，使其表達(dá)量增高，產(chǎn)物穩(wěn)定，且易鑒定、易純化。IPTG經(jīng)常與X-Gal合用，X-Gal的工作濃度一般在5～10μg/ml。

【使用方法】

1、在瓊脂培養(yǎng)基中，加入Amp、IPTG、X-Gal，冷卻制成培養(yǎng)基平板，轉(zhuǎn)化、培養(yǎng)。

2、可根據(jù)長出菌體的藍(lán)白色，而方便地挑選出基因重組體(白色為具有DNA插入片段的基因重組體)。

【注意事項(xiàng)】

1、盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù)，以免失效。

2、注意無菌操作，避免細(xì)菌污染。