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一、發(fā)酵罐、生物發(fā)酵罐使用前的技術準備
1. 對發(fā)酵罐操作人員上崗前的技術培訓:GRJ-D發(fā)酵罐是機電一體化的高科技設備,因此;操作人員上崗前必須進行技術培訓,使他們熟悉整個發(fā)酵系統(tǒng)的工作原理、管路、閥門的操作程序,并對空壓機、電熱蒸汽發(fā)生器能正確操作使用。未經(jīng)培訓的人員,不得單獨上崗操作。
2. 在發(fā)酵罐開機使用之前,應先檢查電源是否正常,空壓機、蒸汽發(fā)生器、循環(huán)水系統(tǒng)是否能正常工作。
3. 檢查整個系統(tǒng)上的閥門、接頭及緊固螺釘是否擰緊。
4. 開動空壓機,用0.15Mpa壓力,檢查發(fā)酵罐、過濾器、管路、閥門的密封性能是否良好,有無泄漏。
5. 溶氧儀、pH儀、PLC系統(tǒng)應根據(jù)使用說明書進行檢查、校正。
6. 上崗人員對上述發(fā)酵罐的各項必須能熟練操作。
二、空消
在投料前,氣路、料路、發(fā)酵罐必須用蒸汽進行滅菌,消除所有死角的雜菌,保證系統(tǒng)處于無菌狀態(tài)。
1. 空氣管路的空消
(1) 空氣管路上有除水減壓閥,和除菌過濾器。除水減壓閥不能用蒸汽滅菌,因此在空氣管路通蒸汽前,必須將通向除水減壓閥的閥門KQF1關死,使蒸汽通過蒸汽過濾器然后進入除菌過濾器。
(2) 空消過程中,除菌過濾器下端的排氣閥應微微開啟,排除冷凝水。
(3) 空消時間應持續(xù)40分鐘左右,當設備初次使用或長期不用后啟動時,采用間歇空消,即*次空消后,暫定3~5小時再空消一次,以便消除芽孢。
(4) 經(jīng)空消后的過濾器,應通氣吹干,約20~30分鐘,然后將氣路閥門關閉。
2.發(fā)酵罐空消
(1)發(fā)酵罐是將蒸汽直接通入罐內(nèi)進行空消。
(2) 空消時,應將罐上的接種口,排氣閥,及料路閥門微微打開,使蒸汽通過這些閥門排出,同時保持罐壓為0.13~0.15Mpa。
(3) 空消時間為30~40分鐘,特殊情況下,可采用間歇空消。
(4)空消結束后,應將罐內(nèi)冷凝水排掉。
注意:1.發(fā)酵罐空消時,應將夾套內(nèi)的水放掉,空消時將夾套排水閥打開,
以防夾套水排不凈。
2.空消時,溶氧、pH電極應取出,可以延長其使用壽命。
三、實消
實消是當發(fā)酵罐罐內(nèi)加入培養(yǎng)基后,用蒸汽對培養(yǎng)基進行滅菌的過程。
1. 空消結束后,首先需將pH、Do電極校正好后裝入罐體中的接頭中,然后將配好的培養(yǎng)基從加料口加入罐內(nèi),此時夾套內(nèi)應無冷卻水。
2. 培養(yǎng)基在進罐之前,應先糊化,一般培養(yǎng)基的配方量以罐體全容積的70%左右計算(泡沫多的培養(yǎng)基為65%左右,泡沫少的培養(yǎng)基可達75~80%),考慮到冷凝水和接種量因素,加水量約為罐體全容積的50~60%左右,加水量的多少與培養(yǎng)基溫度和蒸汽壓力等因素有關,需在實踐中摸索。
3. 為了減少蒸汽冷凝水,實消先利用夾套通蒸汽對培養(yǎng)基進行預熱,保持夾套壓力≤0.1Mpa,待培養(yǎng)基溫度到達
4. 當罐壓升至0.12Mpa,溫度升到121~
5. 打開冷卻水的進排閥門,在夾套內(nèi)通水冷卻。
注意:1.在夾套通水冷卻時,罐壓會急劇下降,當罐內(nèi)壓力降至0.05Mpa時,微微
開啟排氣閥和進氣閥,開啟電機進行通氣攪拌,加速冷卻速度,并保持罐壓為
0.05Mpa,直到罐溫降至接種溫度。
四、接種、培養(yǎng)
1. 本設備采用火焰封口接種,接種前應事先準備好酒精棉花、鉗子、鑷子和接種環(huán)。
2. 菌種裝入三角燒瓶內(nèi),接種量根據(jù)工藝要求確定。
3. 將酒精棉花圍在接種口周圍點燃,用鉗子或鐵棒擰開接種口,此時應向罐內(nèi)通氣,使接種口有空氣排出。
4. 將三角瓶的菌種在火環(huán)中間倒入罐內(nèi)。
5. 將接種口蓋在火焰上滅菌后擰緊。
6. 接種后即可通氣培養(yǎng),罐壓保持在0.05Mpa。
7. 發(fā)酵溫度根據(jù)工藝要求而定,通過調(diào)節(jié)循環(huán)水的溫度來控制發(fā)酵溫度,當環(huán)境溫度高于發(fā)酵溫度時,需用冷水降溫。
8. 溶氧量的大小主要通過調(diào)節(jié)進氣量來實現(xiàn)。
9. pH的調(diào)節(jié)是由控制系統(tǒng)通過執(zhí)行機構(蠕動泵)自動加堿來實現(xiàn)。
10. 泡沫報警是由泡沫探頭探測到泡沫液位信號在觸摸屏上以指示燈的形式來實現(xiàn)。
11. 在發(fā)酵中途要取樣檢查時,可通過取樣口取樣。取樣前,取樣管路閥門需用蒸汽滅菌,防止雜菌污染而引起誤導,取樣結束后同樣要用蒸汽沖洗取樣管道閥門。
五、出料
1. 本設備的出料是利用罐壓將發(fā)酵液從出料管道排出,根據(jù)發(fā)酵液的濃度,罐壓可控制在0.05~0.1Mpa。
2. 出料后取出溶氧、pH電極,進行清洗保養(yǎng)。
3. 出料結束后,應立即放水清洗發(fā)酵罐及料路管道閥門,并開動空壓機,向發(fā)酵罐供氣攪拌,將管路中的發(fā)酵液沖洗干凈。
六、 發(fā)酵罐的維修與保養(yǎng)
1. 安置設備的環(huán)境應整潔、干燥、通風良好,水、汽不得直接潑到電器上。
2. 設備啟用之后,必須及時清洗,防止發(fā)酵液干結在發(fā)酵罐及管路、閥門內(nèi)。
3. 溶解溶氧、pH探頭、儀表,應按規(guī)定要求保養(yǎng)存放,壓力表、安全閥、溫度儀每年應校準一次。
5. 設備停止使用時應清洗、吹干。過濾器的濾芯應取出清洗、涼干,妥善保管,法蘭壓緊螺母應松開,防止密封圈*變形。
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