程： : 

 有機(jī)磷類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的快速檢測

（農(nóng)藥速測卡使用說明）

方法編號：CDC-1011

1 適用范圍：本方法適用于蔬菜、水果、相應(yīng)食物、水及中毒殘留物中有機(jī)磷類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥及鼠藥的快速檢測。本方法引自國家標(biāo)準(zhǔn)快速檢測方法GB/T5009.199-2003。

2 檢測原理：膽堿酯酶可催化靛酚乙酸酯（紅色）水解為乙酸與靛酚（藍(lán)色），有機(jī)磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥對膽堿酯酶有抑制作用，使催化、水解、變色的過程發(fā)生改變，由此判斷樣品中是否含有過量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留。

3 檢測試材

3.1 固化有膽堿酯酶和靛酚乙酸酯試劑的農(nóng)藥速測卡。

3.2 乙酸乙酯

3.3 pH7.5磷酸鹽浸提（緩沖）溶液：分別取15.0g磷酸氫二鈉 [Na₂HPO₄·12H₂O]與1.59g磷酸二氫鉀[KH₂ PO₄ ]，用500mL蒸餾水溶解。

3.4 稱量天平

3.5 有條件時配備專為農(nóng)藥速測卡而設(shè)計的“農(nóng)藥殘留速測儀”和超聲波提取器。

4 蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留量的檢測、結(jié)果判斷與注意事項

4.1 表面測定法（粗篩法）： 擦去蔬菜表面泥土，滴2～3滴浸提液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦。取一片速測卡，將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上。放置10min進(jìn)行預(yù)反應(yīng)，將速測卡對折（紅色藥片與白色藥片疊合）后，用手捏3min時，打開與空白對照實驗卡比較，白色藥片不變色或略有淺藍(lán)色均為陽性結(jié)果。白色藥片變?yōu)樘焖{(lán)色或與空白對照卡相同為陰性結(jié)果。有條件時，將紙片插入“農(nóng)藥殘留速測儀”自動恒溫、定時檢測。

4.2 整體測定法：選取有代表性的蔬菜樣品，擦去表面泥土，剪成1cm左右見方碎片，取5g放入帶蓋瓶中，加入10mL浸提液（樣品與浸提液的比例為1+2），震搖50次（有條件時，可將提取瓶放入超聲波提取器中震蕩30秒），靜置2min以上。取一片速測卡，在白色藥片上滴上2～3滴提取液，放置10min進(jìn)行預(yù)反應(yīng)，將速測卡對折（紅色藥片與白色藥片疊合）后，用手捏3min時，打開與空白對照實驗卡比較，白色藥片不變色或略有淺藍(lán)色均為陽性結(jié)果。白色藥片變?yōu)樘焖{(lán)色或與空白對照卡相同為陰性結(jié)果。有條件時，將紙片插入“農(nóng)藥殘留速測儀”自動恒溫、定時觀察。

4.3注意事項：

4.3.1目前國內(nèi)外所使用的農(nóng)藥殘留測定方法（紙片法和分光光度法）的檢驗原理基本相同，測定中的干擾物質(zhì)也基本相同。蔥、蒜、蘿卜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中含有對酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時（包括含葉綠素較高的蔬菜），不要剪的太碎。測定番茄時，可將提取液放在茄蒂處浸泡2min，取浸泡液測定。測定韭菜或大蒜時，可整根或整粒放入容器中，加入提取液后振搖提取測定。

4.3.2飲用水中的農(nóng)藥檢測，可直接取2～3滴加到速測卡上進(jìn)行操作。茶樹上茶葉中的農(nóng)藥檢測，可按本方法測定，加工后的茶葉，參照“相應(yīng)食物及中毒殘留物中農(nóng)藥的檢測”。

4.3.3檢測樣品的速測卡預(yù)反應(yīng)放置的時間應(yīng)與空白對照卡放置的時間盡量*。紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng)的時間控制在3min，打開觀察結(jié)果的時間應(yīng)以1min內(nèi)為準(zhǔn)。

4.3.4空白對照卡不變色的原因，一是有可能藥片表面提取液加的少、預(yù)反應(yīng)后的藥片表面不夠濕潤；二是提取液（緩沖液）的酸堿度可能有問題（此時可用純凈水作對比確認(rèn)）；三是操作環(huán)境空氣中可能含有農(nóng)藥殘留。

4.3.5在確定樣品為有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥陽性結(jié)果時，應(yīng)是重復(fù)多次檢測的結(jié)果，必要時將樣品送實驗室用氣相色譜儀或質(zhì)譜儀進(jìn)一步確定是哪種農(nóng)藥、確切含量。

5 相應(yīng)食物及中毒殘留物中農(nóng)藥的檢測、結(jié)果判斷與注意事項：

5.1樣品處理與測定：取樣品適量于容器中，加入2倍量的乙酸乙酯，充分震搖后靜置，取澄清液于蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干乙酸乙酯，取1mL磷酸鹽浸提液溶解蒸干后的殘渣，取殘渣溶液2～3滴于速測卡白色藥片上，放置10min進(jìn)行預(yù)反應(yīng)，將速測卡對折（紅色藥片與白色藥片疊合），用手捏3min，打開速測卡，與同時操作的空白對照速測卡（白色藥片上只加浸提液的速測卡）比較，白色藥片不變色為強(qiáng)陽性結(jié)果，略有淺藍(lán)色為弱陽性結(jié)果，天藍(lán)色或與空白對照卡相同，為陰性結(jié)果。

5.2 注意事項：

5.2.1在確定樣品為有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥陽性結(jié)果時，應(yīng)是重復(fù)多次檢測的結(jié)果，對于中毒殘留物，必需將樣品送實驗室用氣相色譜儀或質(zhì)譜儀進(jìn)一步確定是哪種農(nóng)藥、確切含量。

5.2.2其他注意事項與蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留量的測定注意事項相同。

6 農(nóng)藥速測卡的質(zhì)量控制

6.1 按操作方法與注意事項進(jìn)行，只加pH7.5磷酸鹽浸提液或純凈水的農(nóng)藥速測卡應(yīng)變?yōu)樗{(lán)色；0.3mg/kg的敵敵畏或敵百蟲溶液，可使農(nóng)藥速測卡呈陽性反應(yīng)。

7. 產(chǎn)品儲藏與效期：速測卡閉光常溫保存有效期為1年。冷藏可延長有效期。