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測定細菌總數的注意事項有哪些?
用無菌操作法吸取1mL水樣或2~3個適宜稀釋倍數的稀釋水樣,注入滅菌平皿中,再傾注15mL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基并與水樣充分混勻,每個水樣做兩個平行樣,另外每次檢驗還要做只傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的空白對照。
培養(yǎng)之后,應立即進行平皿菌落計數。如果計數必須暫緩進行,可將平皿存放于5~10oC的環(huán)境下,但不能超過24h,而且也不可以將這種做法當作常規(guī)的操作方式。
對平皿菌落計數時,可用肉眼觀察,為防止遺漏,必要時應用放大鏡檢查。對那些看來相似、距離相近但并不相觸的菌落,只要其距離小于小菌落的直徑,就應當分別予以計數。對那些緊密接觸但外觀(形態(tài)或顏色)有差異的菌落也要分別予以計數。
在求同一稀釋度的平均菌落數時,如果其中一個平皿有較大片狀菌落生長時,則不宜采用,而應以無片狀菌落生長的平皿作為該稀釋度的菌落數。如果片狀菌落不到平皿的一半、而其余部分菌落的分布又很均勻時,則可以將生長均勻的1/2平皿菌落計數后乘以2代表全皿菌落數。
細菌總數的測定結果是以每個平皿菌落總數或同一稀釋度平行實驗平皿的平均菌落數乘以稀釋倍數。當終結果在100以內時按實際菌落數記錄結果;大于100時,采用兩位有效數字,用10的指數來表示,如果菌落數無法計數,在報告結果時要注明稀釋倍數。
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