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技術(shù)文章

IPTG溶液(50mg/ml)使用說明書

閱讀:4110          發(fā)布時間:2019-4-25

IPTG溶液(50mg/ml)使用說明書 

【產(chǎn)品組成】

Component

SBJ-2010S

Store at

IPTG solution(50mg/ml)

5ml

-20℃

【保存條件】

-20℃,12個月

【產(chǎn)品概述】

  異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷簡稱IPTG,分子式為C9H18O5S,分子量為238.30CAS號為367-93-1。IPTG是一種作用*的誘導(dǎo)劑,不易被細菌代謝而且很穩(wěn)定。基于這個特性,當攜帶帶lacZ基因載體DNA以lacZ缺失細胞為宿主進行轉(zhuǎn)化時、或用M13噬菌體的載體DNA進行轉(zhuǎn)染時,如果在平板培養(yǎng)基中加入X–gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互補性,可根據(jù)是否呈現(xiàn)藍/白色菌落(或噬菌斑)判斷出基因重組體。此外,它還可以作為具有l(wèi)ac或tac等啟動子的表達載體的表達誘導(dǎo)物使用。

  IPTG溶液(50mg/ml)經(jīng)過濾除菌,一般工作濃度為1mM,主要用于誘導(dǎo)外源基因的表達,也用于原核表達系統(tǒng),使其表達量增高,產(chǎn)物穩(wěn)定,且易鑒定、易純化。IPTG經(jīng)常與X-Gal合用,X-Gal的工作濃度一般在5~10μg/ml。

【使用方法】

1、在瓊脂培養(yǎng)基中,加入Amp、IPTG、X-Gal,冷卻制成培養(yǎng)基平板,轉(zhuǎn)化、培養(yǎng)。

2、可根據(jù)長出菌體的藍白色,而方便地挑選出基因重組體(白色為具有DNA插入片段的基因重組體)。

【注意事項】

1、盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù),以免失效。

2、注意無菌操作,避免細菌污染。

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