詳細介紹
采用的 LC 有許多嚴重的局限性。與其他分離方法相比,色譜的循環(huán)時間相對較長。這往往會限制 LC 在諸如在線監(jiān)測之類的時間關鍵型應用中的使用。此外,每次運行所需的時間限制了方法開發(fā)和優(yōu)化的工作量。由于色譜化學的復雜性,從常規(guī)分析到全面生產過程的許多當前應用都是在次優(yōu)條件下運行的。最后,迄今為止,色譜柱受限的通量限制了 LC 用于從稀釋進料溶液中選擇性吸附材料的使用。
正相色譜: 混合物中的組分將以不同的速率洗脫,這取決于每個組分相對于下一個的極性。當用于分離的色譜柱比流動相更具極性時,該實驗被稱為正相方法。在正相色譜中,固定相是極性的,因此被分離的極性越大的溶質將越多地粘附在固定的吸附劑相上。當溶劑或溶劑梯度通過色譜柱時,極性較小的組分比極性較大的組分洗脫得更快。然后可以按極性遞增的順序單獨收集組分,假設已實現足夠的分離。這種色譜方法不是液固柱色譜所有的,并且經常在執(zhí)行高效液相色譜 (HPLC) 時使用。
反相色譜:在反相色譜中,流動相和固定相的極性與進行正相色譜時的極性相反。不是選擇非極性流動相溶劑,而是選擇極性溶劑。或者,如果實驗需要溶劑極性梯度,則必須首先使用極性大的溶劑,最后使用極性最小的溶劑進行梯度(與正相色譜相反)。溶劑的常見極性溶劑混合物包括水、甲醇和乙腈。獲得固定相為非極性的色譜柱稍微困難和昂貴,因為所有固體吸附劑本質上都是極性的。非極性固定相可以通過用非極性液體涂覆硅烷化硅膠來制備。對硅膠進行硅烷化會減少硅膠' s 吸附極性分子的能力。常見的非極性液相包括有機硅和各種碳氫化合物。在 HPLC 中使用這種類型的色譜柱的替代品,其中使用鍵合液相作為固定相。極性較小的液體與色譜柱中的極性硅膠化學鍵合。因此,使用反相時,樣品溶液中極性大的化合物將首先被洗脫,隨后的組分具有降低的極性。
閃蒸色譜:由于上述常規(guī)柱色譜中流動相的洗脫速率主要受重力控制,因此色譜運行可能需要很長時間才能完成??焖偕V是一種改良的柱色譜方法,其中流動相在加壓空氣或真空的幫助下更快地通過色譜柱。真空管線連接到分離柱的底部,這會以比重力更快的速度拉動流動相溶劑和流動相中的組分通過柱子??梢栽阪溄硬糠挚吹酱嗽O置的圖。快速色譜由壓縮空氣或空氣泵提供動力,通過推動流動相通過色譜柱并實現更快的流動相流速,就像真空促進快速色譜一樣。對于這種方法,在分離柱的頂部連接了一個壓縮空氣管線。正是由于這個原因,快速色譜也被稱為中壓色譜。惰性氣體用于不與流動相或固定相或組分混合物相互作用。這種色譜法通常使用氮氣。許多儀器可用于盡可能高效地進行快速色譜分析:昂貴的色譜柱、泵和流量控制器。這會為色譜柱保持恒定且精確的氣壓或真空,以獲得穩(wěn)定的流動相流速和溶液中樣品的良好分離。然而,可以使用更便宜的替代品,因為可以制作流量控制器,以便可以使用加壓空氣來促進快速色譜法。壓縮空氣管線連接到分離柱的頂部。正是由于這個原因,快速色譜也被稱為中壓色譜。惰性氣體用于不與流動相或固定相或組分混合物相互作用。這種色譜法通常使用氮氣。許多儀器可用于盡可能高效地進行快速色譜分析:昂貴的色譜柱、泵和流量控制器。這會為色譜柱保持恒定且精確的氣壓或真空,以獲得穩(wěn)定的流動相流速和溶液中樣品的良好分離。然而,可以使用更便宜的替代品,因為可以制作流量控制器,以便可以使用加壓空氣來促進快速色譜法。壓縮空氣管線連接到分離柱的頂部。正是由于這個原因,快速色譜也被稱為中壓色譜。惰性氣體用于不與流動相或固定相或組分混合物相互作用。這種色譜法通常使用氮氣。許多儀器可用于盡可能高效地進行快速色譜分析:昂貴的色譜柱、泵和流量控制器。這會為色譜柱保持恒定且精確的氣壓或真空,以獲得穩(wěn)定的流動相流速和溶液中樣品的良好分離。然而,可以使用更便宜的替代品,因為可以制作流量控制器,以便可以使用加壓空氣來促進快速色譜法。