詳細介紹
脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)又稱嘔吐毒素(vomitoxin),主要是由鐮刀菌的某些種產(chǎn)生的化學 結(jié)構(gòu)和生物活性 相似的有毒代謝產(chǎn)物——單端孢霉烯族化合物中的一種。DON 的主要產(chǎn)生菌是禾谷鐮刀菌(Fusariumgraminearum),據(jù)報道也有其它一些鐮刀菌可產(chǎn)生 。DON于1972年由日本的Morooka等*分離,同年,Yoshizawa等闡明了這種新的真菌毒素的結(jié)構(gòu),并將其命名為4- deoxynivalenol(DON) 。DON廣泛存在于,主要污染小麥、大麥、玉米等谷類作物,也污染糧食制品,人和動物在誤食被該毒素污染的糧谷類后可以產(chǎn)生廣泛的毒性效應。另外,它 還常與其它的霉鹵毒素共同污染農(nóng)作物,進入人體后可以相互影響。近年來發(fā)現(xiàn)DON可能與人類食管癌、IgA有關,對人類及動物的健康構(gòu)成 威脅。DON屬于劇毒或中等毒物,研究表明,DON在體內(nèi)可能有一定的蓄積,但無特殊的靶器官,具有很強的細胞毒性。人畜攝入了被DON污染的食物/飼料 后,會導致厭食、嘔吐、腹瀉、發(fā)燒、站立不穩(wěn)、反應遲鈍等急性中毒癥狀,嚴重時損害造血系統(tǒng)造成死亡,但不同的動物對DON的敏感程度不一,豬是敏感的 動物。研究表明,DON可能對免疫系統(tǒng)有影響,有明顯胚胎毒性和一定致畸作用,可能有遺傳毒性,但無致癌、致突變作用。由于DON的危害嚴重,引起了各國 的普遍重視。谷物及飼料中DON的含量有嚴格的*。我國谷物中DON 的*為1.0 mg/kg 。
【小麥嘔吐毒素檢測試紙條檢測前準備】
1. 將待用嘔吐毒素熒光定量快速檢測試紙條、樣品提取液、樣品稀釋液恢復至室溫;
2. 將試紙條恒溫孵育器開機,待溫度升至 37℃后即可使用;
3. 將熒光讀數(shù)儀開機,預熱 10min,插入本批次產(chǎn)品所對應的 ID 卡(每批次產(chǎn)品只需插一次即可),如需切換
檢測項目,掃描相應項目和批次的條形碼即可。
測試步驟
1. 取有代表性的樣品 300-500g,粉碎機粉碎(細度為 90%顆粒物可通過 20 目篩),對粉碎后的樣品再次混勻并進行二次取樣;
2. 準確稱取 5.0±0.05g 粉碎后的樣品于 50mL 離心管中,加入 25mL 樣品提取液(1:5 提取),振蕩提取 5min;
(①待測樣品稱取量與提取液加入量可以同比例放大進行提取;②當待測樣品吸水量過大不易提取時,可采用 1:10 比例提取,檢測結(jié)果乘以 2 即為樣品嘔吐毒素的殘留濃度)
3. 提取結(jié)束后,4000rpm 離心 2min(如未配置離心機,可靜置 3-5min 待分層明顯),取 100μL 上清液,加入到 1000μL 樣品稀釋液中,混勻備用。
4、拆開包裝袋,取出檢測試紙條,打開包裝后請立即使用;
5、用移液槍吸取稀釋后的待測液 100μL 加到試紙條上的加樣孔中,開始計時孵育 8 min(蓋上孵育器蓋);
6、孵育結(jié)束后,將試紙條插入熒光讀數(shù)儀中,按讀數(shù)鍵或者觸摸屏幕讀數(shù)即可;
小麥嘔吐毒素檢測試紙條結(jié)果解釋
1. 定量檢測結(jié)果將呈現(xiàn)于熒光讀數(shù)儀液晶顯示屏上,同時可按打印鍵打印獲得紙質(zhì)的檢測報告;
2. 陰性(-):檢測結(jié)果
3. 陽性(+):檢測結(jié)果≥cut-off 值(可根據(jù)客戶的內(nèi)控質(zhì)量標準進行調(diào)整);
4. 無效:讀數(shù)儀報錯,則本次檢測無效,需重新測試;
5. 如檢測結(jié)果超出定量范圍的上限,可取離心后的上清液,用樣品提取液稀釋 5 倍后再次檢測(即先取 100μL離心后的上清液,加 400μL 樣品提取液混勻,再取 100μL 混勻后液體,加入到 1000μL 樣品稀釋液中混勻,后取 100μL 稀釋后的液體加入試紙條的加樣孔中即可),檢測結(jié)果乘以 5,即為樣品的終濃度。