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魚鱗膠原蛋白的提取方法
閱讀：255 發(fā)布時間：2022-9-20
2魚鱗膠原蛋白的提取方法
2.1傳統(tǒng)提取方法
傳統(tǒng)的提取方法是酸堿處理法，制備膠原蛋白的工藝是：原料→預(yù)處理→酸處理→堿處理→熬膠→膠液過濾→濃縮→切片→干燥→成品。
將魚鱗洗凈，必要時要進行脫脂脫色，然后用鹽酸浸泡進行脫鈣處理，直到鱗片柔軟透明；取出洗凈后浸灰，主要是使得原料組織疏松。洗凈后放在夾層鍋中加熱熬膠，提盡為止。趁熱轉(zhuǎn)盤，凝固成膠凍，干燥后使含水量＜15%，即得成品。然而，傳統(tǒng)的提取方法步驟繁多，耗時長且在提取過程中膠原蛋白流失較大，不適于大規(guī)模的生產(chǎn)。
2.2 酸提取法
酸提取法即是利用酸在一定的外界環(huán)境條件下提取膠原蛋白，使用的酸有鹽酸、檸檬酸、乳酸、醋酸等。
利用乙酸從鯉魚魚鱗中提取膠原蛋白，經(jīng)過響應(yīng)面分析實驗得到提取工藝。在提取過程中發(fā)現(xiàn)，乙酸濃度過高反而會使膠原蛋白的提取率有下降的趨勢，主要原因是較高的乙酸濃度會增加膠原蛋白的溶解速率，使提取液的黏度迅速增大，反而不利于后期的提取。
分別用醋酸、檸檬酸、乳酸來提取草魚魚鱗的膠原蛋白，結(jié)果表明檸檬酸提取膠原蛋白的得率，乳酸次之，醋酸。
總體上說，酸提取膠原蛋白在前處理中不能用酸進行處理，因而有部分雜蛋白難以去除，在后續(xù)提取得到的膠原蛋白含雜蛋白較多，從而就增大了膠原蛋白純化的工作量。酸提取方法步驟過于繁瑣，在常溫下提取，大量膠原蛋白損失。
2.3 酶提取法
酶法制備即是利用各種不同的酶在一定的外界環(huán)境條件下提取膠原蛋白，常采用的酶有、木瓜蛋白酶、、等。原料經(jīng)過前處理后加入不同的酶提取得到酶促溶性膠原蛋白。
采用堿性蛋白酶酶解魚鱗，得到的魚鱗水解蛋白有很好的吸水性、乳化性、起泡性和溶解性。
以乙酸為的溶劑酶解魚鱗提取膠原蛋白，由于乙酸也可以水解膠原蛋白，因此，此方法提取得到的膠原蛋白既有酶溶性的也有酸溶性的。但是實驗的提取的時間太長，不適于工業(yè)生產(chǎn)。
比較了多種酶(枯草桿菌蛋白酶、、木瓜蛋白酶)在其各自的條件下對膠原蛋白的水解情況，而利用混合酶水解在相同的時間內(nèi)水解度較高。雖然多酶的水解度高，但成本太高，同樣不利于大規(guī)模的生產(chǎn)加工。
在酶水解提取中，還存在一個問題，隨著酶的水解作用，在水解產(chǎn)物中容易有苦肽的出現(xiàn)。并且研究發(fā)現(xiàn)水解度與苦味肽的生成呈線性關(guān)系，因此不難推想，選擇合適的水解度可有效控制苦味肽的生成。因而，在酶法提取膠原蛋白中找到一個水解度又高，苦肽生成量又少的點是至關(guān)重要的。
2.4 微生物發(fā)酵提取法
用枯草芽孢桿菌發(fā)酵后將上清液經(jīng)膜系統(tǒng)分離，然后將精制液進行真空濃縮至濃度，然后噴霧干燥得魚鱗膠原蛋白肽粉末成品，此法技術(shù)上尚不成熟，但有研究前景，微生物發(fā)酵方法是現(xiàn)代提取方法的熱門話題。
2.5 熱水處理法
熱水提取就是原料經(jīng)過各種前處理后在一定條件下用熱水浸提，從而得到水溶性膠原蛋白的方法。
魚鱗水法制膠的溫度在60～70℃。溫度高些有助于提膠，但溫度過高抽提率還有所下降。超過70℃后，所制得的魚鱗膠的固含量反而會有降低的現(xiàn)象，隨著固含量的降低，魚鱗膠的折光率和增比黏度都會降低，導致魚鱗膠的質(zhì)量有所下降。液比(魚鱗與水的質(zhì)量比)越小，所制得的膠黏度越高，魚鱗膠的質(zhì)量也相對好；可是液比太小抽提膠困難，抽提率小。因此抽提魚鱗膠的液比以1∶1～1∶1.5為。
在比較熱力法和酶解法提取魚鱗膠原蛋白中，熱力法的提取率比酶解法高，并且熱力法提取的膠原蛋白有較高的保水性、乳化能力和乳化穩(wěn)定性及泡沫穩(wěn)定性。
2.1傳統(tǒng)提取方法
傳統(tǒng)的提取方法是酸堿處理法，制備膠原蛋白的工藝是：原料→預(yù)處理→酸處理→堿處理→熬膠→膠液過濾→濃縮→切片→干燥→成品。
將魚鱗洗凈，必要時要進行脫脂脫色，然后用鹽酸浸泡進行脫鈣處理，直到鱗片柔軟透明；取出洗凈后浸灰，主要是使得原料組織疏松。洗凈后放在夾層鍋中加熱熬膠，提盡為止。趁熱轉(zhuǎn)盤，凝固成膠凍，干燥后使含水量＜15%，即得成品。然而，傳統(tǒng)的提取方法步驟繁多，耗時長且在提取過程中膠原蛋白流失較大，不適于大規(guī)模的生產(chǎn)。
2.2 酸提取法
酸提取法即是利用酸在一定的外界環(huán)境條件下提取膠原蛋白，使用的酸有鹽酸、檸檬酸、乳酸、醋酸等。
利用乙酸從鯉魚魚鱗中提取膠原蛋白，經(jīng)過響應(yīng)面分析實驗得到提取工藝。在提取過程中發(fā)現(xiàn)，乙酸濃度過高反而會使膠原蛋白的提取率有下降的趨勢，主要原因是較高的乙酸濃度會增加膠原蛋白的溶解速率，使提取液的黏度迅速增大，反而不利于后期的提取。
分別用醋酸、檸檬酸、乳酸來提取草魚魚鱗的膠原蛋白，結(jié)果表明檸檬酸提取膠原蛋白的得率，乳酸次之，醋酸。
總體上說，酸提取膠原蛋白在前處理中不能用酸進行處理，因而有部分雜蛋白難以去除，在后續(xù)提取得到的膠原蛋白含雜蛋白較多，從而就增大了膠原蛋白純化的工作量。酸提取方法步驟過于繁瑣，在常溫下提取，大量膠原蛋白損失。
2.3 酶提取法
酶法制備即是利用各種不同的酶在一定的外界環(huán)境條件下提取膠原蛋白，常采用的酶有、木瓜蛋白酶、、等。原料經(jīng)過前處理后加入不同的酶提取得到酶促溶性膠原蛋白。
采用堿性蛋白酶酶解魚鱗，得到的魚鱗水解蛋白有很好的吸水性、乳化性、起泡性和溶解性。
以乙酸為的溶劑酶解魚鱗提取膠原蛋白，由于乙酸也可以水解膠原蛋白，因此，此方法提取得到的膠原蛋白既有酶溶性的也有酸溶性的。但是實驗的提取的時間太長，不適于工業(yè)生產(chǎn)。
比較了多種酶(枯草桿菌蛋白酶、、木瓜蛋白酶)在其各自的條件下對膠原蛋白的水解情況，而利用混合酶水解在相同的時間內(nèi)水解度較高。雖然多酶的水解度高，但成本太高，同樣不利于大規(guī)模的生產(chǎn)加工。
在酶水解提取中，還存在一個問題，隨著酶的水解作用，在水解產(chǎn)物中容易有苦肽的出現(xiàn)。并且研究發(fā)現(xiàn)水解度與苦味肽的生成呈線性關(guān)系，因此不難推想，選擇合適的水解度可有效控制苦味肽的生成。因而，在酶法提取膠原蛋白中找到一個水解度又高，苦肽生成量又少的點是至關(guān)重要的。
2.4 微生物發(fā)酵提取法
用枯草芽孢桿菌發(fā)酵后將上清液經(jīng)膜系統(tǒng)分離，然后將精制液進行真空濃縮至濃度，然后噴霧干燥得魚鱗膠原蛋白肽粉末成品，此法技術(shù)上尚不成熟，但有研究前景，微生物發(fā)酵方法是現(xiàn)代提取方法的熱門話題。
2.5 熱水處理法
熱水提取就是原料經(jīng)過各種前處理后在一定條件下用熱水浸提，從而得到水溶性膠原蛋白的方法。
魚鱗水法制膠的溫度在60～70℃。溫度高些有助于提膠，但溫度過高抽提率還有所下降。超過70℃后，所制得的魚鱗膠的固含量反而會有降低的現(xiàn)象，隨著固含量的降低，魚鱗膠的折光率和增比黏度都會降低，導致魚鱗膠的質(zhì)量有所下降。液比(魚鱗與水的質(zhì)量比)越小，所制得的膠黏度越高，魚鱗膠的質(zhì)量也相對好；可是液比太小抽提膠困難，抽提率小。因此抽提魚鱗膠的液比以1∶1～1∶1.5為。
在比較熱力法和酶解法提取魚鱗膠原蛋白中，熱力法的提取率比酶解法高，并且熱力法提取的膠原蛋白有較高的保水性、乳化能力和乳化穩(wěn)定性及泡沫穩(wěn)定性。