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技術(shù)文章

倒置熒光顯微鏡的構(gòu)成及其成像原理

閱讀:447          發(fā)布時(shí)間:2013-4-7

 倒置熒光顯微鏡是近代發(fā)展起來的新式熒光顯微鏡,特點(diǎn)是激發(fā)光從物鏡向下落射到標(biāo)本表面,即用同一物鏡作為照明聚光器和收集熒光的物鏡。光路中需加上一個(gè)雙色束分離器,它與光鈾呈45。角,激發(fā)光被反射到物鏡中,并聚集在樣品上,樣品所產(chǎn)生的熒光以及由物鏡透鏡表面、蓋玻片表面反射的激發(fā)光同時(shí)進(jìn)入物鏡,反回到雙色束分離器,使激發(fā)光和熒光分開,殘余激發(fā)光再被阻斷濾片吸收。如換用不同的激發(fā)濾片/雙色束分離器/阻斷濾片的組合插塊,可滿足不同熒光反應(yīng)產(chǎn)物的需要。此種熒光顯微鏡的優(yōu)點(diǎn)是視野照明均勻,成像清晰,放大倍數(shù)愈大熒光愈強(qiáng)。倒置熒光顯微鏡由熒光附件與倒置顯微鏡有機(jī)結(jié)合構(gòu)成的,主要用于細(xì)胞等活體組織的熒光、相差觀察。 倒置顯微鏡(Inverted microscope)是為了適應(yīng)生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域中的組織培養(yǎng)、細(xì)胞離體培養(yǎng)、浮游生物、環(huán)境保護(hù)、食品檢驗(yàn)等顯微觀察。由于這些活體被檢物體均放置在培養(yǎng)皿(或培養(yǎng)瓶)中,這樣就要求倒置顯微鏡的物鏡和聚光鏡的工作距離很長,能直接對(duì)培養(yǎng)皿中的被檢物體進(jìn)行顯微觀察和研究。因此,物鏡、聚光鏡和光源的位置都顛倒過來,故稱為"倒置顯微鏡"。倒置顯微鏡多用于無色透明的活體觀察,在倒置顯微鏡的基礎(chǔ)上添加一套熒光附件:激光激發(fā)塊,熒光光源,熒光照明器,激發(fā)塊切換裝置,即可進(jìn)行倒置熒光觀察。

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