高效液相色譜儀測定中藥材血竭中血竭素含量:血竭又被稱為麒麟竭,具有活血定痛、化瘀止血、生肌斂瘡的功效,用于跌打損傷、心腹瘀痛、外傷出血、瘡瘍不斂等癥狀。2015年版《中國藥典》一部記載血竭為棕櫚科植物麒麟竭Daemonorops draco Bl.果實(shí)滲出的樹脂經(jīng)加工制成。歷*,作為中藥所使用的血竭是外來品種。在市場上血竭主產(chǎn)于印度尼西亞和馬來西亞,又稱為“進(jìn)口血竭"。
《中國藥典》2015版規(guī)定血竭的主要有效成分為血竭素(dracorhodin),且規(guī)定血竭中血竭素的含量不得低于1%。
作為血竭的功效成分,許多中成藥復(fù)方制劑常以血竭素作為定量指標(biāo),用于評價(jià)制劑工藝及穩(wěn)定性的優(yōu)劣,并制定制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。血竭素定量分析方法有薄層掃描法、高效液相色譜(HPLC)法和導(dǎo)數(shù)光譜法等,而高效液相色譜儀測定中藥材血竭中血竭素含量方案以其簡便、可行、結(jié)果可靠得以普遍應(yīng)用。
儀器設(shè)備:潤揚(yáng)LC-3000高效液相色譜儀,CXTH3000色譜工作站;Kromasil C18(4.6 mm×250mm,5 μm)HPLC色譜柱;柱溫箱;真空泵;溶劑過濾器;十萬分之一天平。
溶劑:乙睛 ( 色譜級),甲醇、磷酸、(分析純);血蝎素高氯酸鹽;血竭樣品。
色譜條件與系統(tǒng)分析:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈一0.05mol/L*溶液(50:50)為流動(dòng)相;檢測波長為440nm;柱溫40℃。理論板數(shù)按血竭素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。
對照品溶液的制備:取血竭素高氯酸鹽對照品9mg,精密稱定,置50ml棕色量瓶中,加3%磷酸甲醇溶液使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,精密量取1ml,置5ml棕色量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻即得(每1ml中含血竭素26μg)(血竭素重量=血竭素高氯酸鹽重量/1.377)。
供試品溶液的制備:取本品適量,研細(xì),取0.05~0.15g,精密稱定,置具塞試管中,精密加入3%磷酸甲醇溶液10ml,密塞。振搖3分鐘,濾過,精密量取續(xù)濾液1ml,置5ml棕色量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得。
高效液相色譜儀測定法:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul,注入液相色譜儀,測定,即得。
純血竭素性質(zhì)極不穩(wěn)定,中藥血竭存在對熱不穩(wěn)定性,不同的溫度對其穩(wěn)定性影響程度不同,溫度在70 ℃以下時(shí)對血竭素含量幾乎無影響,穩(wěn)定性較好;而在70 ℃以上時(shí)則隨溫度升高血竭素含量下降明顯加快。故本制劑供試品溶液的制備采用超聲提取的方法。本方案優(yōu)化了不同超聲處理時(shí)間對提取結(jié)果的影響,結(jié)果超聲處理10 min血竭素即可較好提取。
本潤揚(yáng)分析儀器有限公司制定的方法簡便、可行、結(jié)果可靠,可作為控制血竭產(chǎn)品質(zhì)量的檢測方法。