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《飼料中維生素A的測(cè)定高效液相色譜法》征求意見

2023-10-18 09:57:23 來源：儀表網(wǎng) 閱讀量：10478

　　近日，由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所[國家飼料質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心(北京)] 、山東省飼料質(zhì)量檢驗(yàn)所、帝斯曼維生素(上海)有限公司、四川威爾檢測(cè)技術(shù)股份有限公司等單位起草，TC76(全國飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì))歸口的國家標(biāo)準(zhǔn)計(jì)劃《飼料中維生素A的測(cè)定高效液相色譜法》征求意見稿已編制完成，現(xiàn)公開征求意見。

　　維生素是具有高度生物學(xué)活性的有機(jī)化合物，是維持動(dòng)物正常生命和生長所必需的一類特殊的營養(yǎng)物質(zhì)。維生素 A 有天然和人工合成兩類。天然的維生素 A 只存在于動(dòng)物性食物中，主要存在于肝臟中，植物組織中尚未發(fā)現(xiàn)，人工合成的主要有維生素 A 乙酸酯、維生素 A 棕櫚酸酯。用作飼料添加劑的主要以合成維生素 A 產(chǎn)品為主。

　　維生素 A 不溶于水而溶于油脂和乙醇等脂溶性溶劑。分子中含多個(gè)不飽和鍵，化學(xué)性質(zhì)活潑，對(duì)空氣、熱、濕度和光敏感，在光和空氣中易被氧化而失去生理效能，為了增加維生素 A 的穩(wěn)定性，維生素 A 除脂化、添加抗氧化劑外，目前常用的方法還有用穩(wěn)定的物質(zhì)明膠、淀粉進(jìn)行包被。

　　維生素 A 在維護(hù)動(dòng)物視覺、維護(hù)黏膜的完整性、促進(jìn)生長和生殖、影響造血機(jī)能、抗氧化、抑制腫瘤、維持正常的免疫功能等方面都起著極其重要的作用，是各種養(yǎng)殖動(dòng)物必需添加的微量營養(yǎng)成分，因此添加劑預(yù)混合飼料中維生素 A 乙酸酯也常被列為國家監(jiān)督抽查必檢項(xiàng)目。

　　現(xiàn)行國標(biāo) GB/T 17817-2010 已頒布實(shí)施十幾年，原標(biāo)準(zhǔn)方法中皂化法檢測(cè)步驟多，時(shí)間長，多年來，制標(biāo)單位一直致力于研發(fā)快速準(zhǔn)確的檢測(cè)方法，固相萃取、在線固相萃取-二維液相色譜法與原皂化法比較，可節(jié)省大量化學(xué)試劑，縮短檢測(cè)時(shí)間，能夠滿足檢測(cè)方法允許誤差要求。

　　本文件按照GB/T 1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。

　　本文件代替GB/T 17817-2010《飼料中維生素A的測(cè)定高效液相色譜法》，與GB/T17817-2010相比，除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動(dòng)外，主要技術(shù)變化如下：

　　a)皂化提取法范圍增加了精料補(bǔ)充料，直接提取法范圍增加復(fù)合預(yù)混合飼料。直接提取法更改了定量限(見第 1 章，2010 年版的第 1 章)；

　　b)皂化提取法提取劑更改為石油醚(沸程 30 ℃-60 ℃)(見第 4 章，2010 年版第 3 章)；

　　c)第一法中增加了維生素 A 標(biāo)準(zhǔn)系列溶液(見 4.2.19)

　　d)第一法中配合飼料、精料補(bǔ)充料、濃縮飼料樣品制備方法更改為試樣全部通過 1 mm孔篩(見 4.4，2010 年版中 3.5)；

　　e)增加了離線固相萃取法(4.5.1.2.2)和在線固相萃取法(4.5.1.2.3)及其色譜圖；

　　f)增加了液相色譜參考條件(見 4.5.2.2 和 4.5.2.3)；

　　g)增加了定性檢測(cè)方法，定量檢測(cè)增加多點(diǎn)校正(見第 4 章)；

　　h)更改了第一法中試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理(見 4.6，2010 年版的 3.6.2.3)；

　　i)刪除了正相色譜條件(2010 年版第 3 章)；

　　j)更改了直接提取法提取溫度，由 65 ℃改為室溫(見第 5 章，2010 年版第 4 章)；

　　k)增加了直接提取法中維生素 A 標(biāo)準(zhǔn)系列溶液(見 5.2.4)

　　l)更改了直接提取法中試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理(見 5.6，)

　　m)增加校正維生素 A 及維生素 A 乙酸酯標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液濃度的方法(見附錄 A)。

　　本文件描述了飼料中維生素A的高效液相色譜測(cè)定方法。

　　本文件中“第一法皂化提取法”適用于配合飼料、精料補(bǔ)充料、濃縮飼料、復(fù)合預(yù)混合飼料、維生素預(yù)混合飼料中維生素 A 的測(cè)定；“第二法直接提取法”適用于復(fù)合預(yù)混合飼料、維生素預(yù)混合飼料中維生素 A 乙酸酯的測(cè)定。

　　本文件第一法定量限為 1000 IU/kg，第二法定量限為 20000 IU/kg。

　　第一法皂化提取法

　　原理：

　　試樣用堿溶液皂化后，經(jīng)液液萃取或固相萃取凈化后，用高效液相色譜儀分離測(cè)定，外標(biāo)法定量。

　　儀器設(shè)備：

　　1.高效液相色譜儀：配有紫外檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器。

　　2.紫外可見分光光度計(jì)：帶1cm 石英比色皿。

　　3.分析天平：精度為0.001g、0.0001g和0.00001g。

　　4.回流裝置：圓底燒瓶和冷凝管。

　　5.恒溫水浴，控溫精度±2℃。

　　6.旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

　　7.離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于 10000 r/min。

　　8.固相萃取裝置。

　　9.氮吹儀。

　　10.渦旋混合器。

　　第二法直接提取法

　　原理：

　　用甲醇溶液提取試樣中的維生素 A 乙酸酯，高效液相色譜儀測(cè)定，外標(biāo)法定量。

　　儀器設(shè)備：

　　1.高效液相色譜儀：配有紫外檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器。

　　2.紫外-可見分光光度計(jì)：帶1cm石英比色皿。

　　3.分析天平：精度為0.0001g和0.00001g。

　　4.超聲波清洗器：頻率不低于35000Hz。

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