1 檢測(cè)原理
萊克多巴胺膠體金試紙卡應(yīng)用了競(jìng)爭(zhēng)抑制免疫層析的原理,樣本中的萊克多巴胺在流動(dòng)過(guò)程中與膠體金標(biāo)記的特異性單克隆抗體結(jié)合,抑制了抗體和 NC 膜檢測(cè)線(T 線)上的萊克多巴胺—BSA偶聯(lián)物的結(jié)合,從而導(dǎo)致檢測(cè)線顏色深淺的變化。當(dāng)樣本中沒(méi)有萊克多巴胺或萊克多巴胺濃度低于檢測(cè)*,T 線顯色;當(dāng)樣本中的萊克多巴胺濃度等于或高于檢測(cè)*,T線不顯色;而無(wú)論樣本中是否含有萊克多巴胺,質(zhì)控線(C 線)都會(huì)顯色,以示檢測(cè)有效。
2 適用范圍
本產(chǎn)品適用于尿液、組織、飼料樣本中萊克多巴胺的定性檢測(cè)。
3 檢出限
1)尿樣: 5ng/mL(5ppb);
2)組織: 3ng/g(3ppb);
3)飼料: 3ng/g(3ppb)。
4 產(chǎn)品組成
1)萊克多巴胺膠體金試紙卡(20支);
2)一次性吸管(20支);
3)說(shuō)明書(1份)。
5 樣本前處理方法
5.1尿樣樣本處理方法如下:
1)直接取澄清新鮮無(wú)污染尿樣待檢(注意:尿樣不要在冷藏后立即進(jìn)行檢測(cè)。尿樣樣本必須收集在潔凈、干燥、不含有任何防腐劑的塑料尿杯或玻璃容器內(nèi),如尿樣混濁,可在室溫4000r/min條件下離心5min處理后待檢。如尿樣樣本不能及時(shí)檢測(cè),可于(2~8)℃冷藏保存24小時(shí),長(zhǎng)期保存需冷凍 -20℃,切忌反復(fù)凍融樣本)。
5.2組織樣本方法一處理方法如下:
1)稱取(5.0±0.05)g勻質(zhì)的肌肉組織樣本于50mL塑料離心管中,固定在漂浮泡沫墊上置于90℃以上水浴鍋中水浴10min;
2)冷卻至常溫后,取(2~3)滴煮出的溶液檢測(cè)(盡量吸取肉汁中上清)。
5.3組織樣本方法二處理方法如下:
1) 稱取(5.0±0.05 )g組織,加入5g*,再加入5mL乙腈,振蕩3min;在4000r/min的條件下離心10min;
2)取4mL上清液于潔凈試管,56℃水浴空氣流或氮?dú)饬鞔蹈珊笥?.3mL純凈水復(fù)溶,振蕩混合1min,溶解后的液體直接用于檢測(cè)。
5.4飼料樣本處理方法如下:
1)稱取(5.0±0.05)g飼料,加入10mL純凈水,再加入5mL乙酸乙酯,振蕩(3~5)min,4000r/min離心10min;
2)取2mL上清液于潔凈試管,56℃水浴空氣流或氮?dú)饬鞔蹈珊?,加?.3mL純凈水與2mL正己烷,振蕩1min,4000r/min離心5min,除去上層液體,取下層液體2滴檢測(cè)。
注:克侖特羅、萊克多巴胺、*組織和飼料樣品可以處理后三個(gè)項(xiàng)目進(jìn)行同時(shí)檢測(cè)。
6 操作步驟
1)從原包裝袋中取出試紙卡,打開后請(qǐng)?jiān)谝粋€(gè)小時(shí)內(nèi)盡快使用;
2)用一次性吸管吸取待檢樣本垂直滴加 (2~3 )滴(約 70uL)于加樣孔中;
3)液體流動(dòng)時(shí)開始計(jì)時(shí),反應(yīng) (5~8)min后,根據(jù)示意圖判定結(jié)果。其他時(shí)間判定無(wú)效。
7 結(jié)果判斷
根據(jù)顯色不同,可作如下定性判斷(如圖1所示):
1)陰性(-):C 線顯色,T 線顯色(與C線比較),均表示樣本中萊克多巴胺濃度低于檢出限;
2)陽(yáng)性(+):C 線顯色,T 線不顯色,均表示樣本中萊克多巴胺濃度等于或高于檢出限;
3)無(wú)效:未出現(xiàn) C 線,表明不正確的操作過(guò)程或試紙卡已失效。在此情況下,應(yīng)再次仔細(xì)閱讀說(shuō)明書,并用新的試紙卡重新測(cè)試。
陰性 陽(yáng)性 無(wú)效
圖1 結(jié)果判定示意圖
8 注意事項(xiàng)
1)請(qǐng)按照操作步驟進(jìn)行測(cè)試,盡量不要觸摸試紙卡的白色膜面,檢測(cè)時(shí)避免陽(yáng)光直射;
2)本試紙卡為一次性產(chǎn)品,請(qǐng)勿重復(fù)使用;
3)本產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果僅供參考,如需確證,請(qǐng)參照國(guó)家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)方法。
9 特異性
本產(chǎn)品與*、*、四環(huán)素、磺胺類、喹諾酮類等其他種類藥物無(wú)交叉反應(yīng)。
10 儲(chǔ)存及有效期
1)儲(chǔ)存條件:儲(chǔ)存試紙卡于4℃~20℃陰涼避光干燥環(huán)境中;
2)有效期:該產(chǎn)品有效期為12 個(gè)月。