背景資料:
細菌廣泛用于表達不同的蛋白質(zhì)。然而,通過重組技術(shù)在細菌中表達的70-80%的蛋白典型地包含在不溶性包涵體中(即不溶性包涵體)。、蛋白質(zhì)聚集)。由于折疊錯誤,在這些亞細胞結(jié)構(gòu)中發(fā)現(xiàn)的蛋白質(zhì)通常是不活躍的。包涵體中重組蛋白的產(chǎn)率始終高于可溶性蛋白。這背后的原因被認為是不溶性蛋白對細胞酶解蛋白的抵抗力。
此外,不溶性重組蛋白在包涵體中的分離要比可溶性蛋白容易得多。這些因素已成為主要的影響,有利于擴大高價值的蛋白質(zhì)使用細菌發(fā)酵為例。從包涵體中純化表達蛋白的過程往往是勞動密集型、耗時性和*效益的。該試劑盒提供了細胞分裂,包涵體溶解和純化的基本試劑,使用自旋柱色譜-所有優(yōu)化工作,從而簡化了過程,節(jié)省了大量的時間和成本。
產(chǎn)品描述:
該試劑盒提供了從誘導(dǎo)的細菌培養(yǎng)中分離和純化包涵體蛋白所需的一切。首先,使用專有的細胞裂解試劑選擇性地裂解細胞并釋放固態(tài)的包膜體。接下來,使用所提供的IB增溶試劑溶解包涵體并釋放其內(nèi)容物。
然后利用自旋柱進一步純化包涵體蛋白,以便快速、方便地進行緩沖交換和脫鹽。該程序是高效和精簡的,可以處理多達12個樣品在大約2小時。每個自旋柱能夠從100毫升的誘導(dǎo)細菌培養(yǎng)中回收多達12毫克的酸性或堿性蛋白質(zhì)。純化后的重組蛋白可用于SDS-PAGE、2D凝膠、Western blots、質(zhì)譜分析等應(yīng)用。
產(chǎn)品特點:
包涵體蛋白分離純化一體化解決方案全套試劑盒,包含細胞裂解試劑、包涵體增溶試劑、緩沖液、自旋柱純化蛋白;每根自旋柱分離多12毫克蛋白質(zhì);快速方便的自旋列協(xié)議。
保存建議:
Cell Lysis Reagent和IB Solubilization Reagent儲存在4°C。所有其他未開封的溶液應(yīng)在室溫下儲存。一旦打開,溶液應(yīng)儲存在4°C,除了堿性和酸性結(jié)合緩沖液,應(yīng)在室溫下儲存。具體保存情況收到產(chǎn)品后請按說明書存放。