碧云天生產(chǎn)的顯色法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit）為您提供了一種高靈敏度又快速簡(jiǎn)便的細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法。對(duì)于待檢測(cè)的細(xì)胞或組織樣品，經(jīng)過*標(biāo)記和后續(xù)的DAB顯色等步驟，即可在普通光學(xué)顯微鏡下觀察到凋亡細(xì)胞。
細(xì)胞在發(fā)生凋亡時(shí)，會(huì)激活一些DNA內(nèi)切酶，這些內(nèi)切酶會(huì)切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時(shí)抽提DNA進(jìn)行電泳檢測(cè)，可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder?；蚪MDNA斷裂時(shí)，暴露的3'-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT）的催化下加上*（Biotin）標(biāo)記的dUTP（Biotin-dUTP），隨后和辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的Streptavidin （Streptavidin-HRP）結(jié)合，zui后在HRP的催化下通過DAB顯色來顯示凋亡細(xì)胞，從而可以通過普通光學(xué)顯微鏡檢測(cè)到凋亡的細(xì)胞，這就是本試劑盒通過TUNEL（TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling）法檢測(cè)細(xì)胞凋亡的原理。
本試劑盒有如下優(yōu)點(diǎn)。（1）高靈敏度：可以在單細(xì)胞水平檢測(cè)到細(xì)胞凋亡，同時(shí)由于凋亡早期就有DNA斷裂，可以檢測(cè)到早期的細(xì)胞凋亡。（2）特異性好：TUNEL檢測(cè)時(shí)通常更容易標(biāo)記凋亡細(xì)胞，而不容易標(biāo)記壞死細(xì)胞。（3）快速：僅需約2-3個(gè)小時(shí)即可完成。（4）應(yīng)用范圍廣：可以用于檢測(cè)冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況，也可以檢測(cè)培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況。
TUNEL法特異性檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí)產(chǎn)生的DNA斷裂，但不會(huì)檢測(cè)出射線等誘導(dǎo)的DNA斷裂（和細(xì)胞凋亡時(shí)的斷裂方式不同）。這樣一方面可以把凋亡和壞死區(qū)分開，另一方面也不會(huì)把射線等誘導(dǎo)發(fā)生DNA斷裂的非凋亡細(xì)胞判斷為凋亡細(xì)胞。
極少數(shù)細(xì)胞凋亡時(shí)沒有DNA斷裂，此時(shí)不適用TUNEL法檢測(cè)。在個(gè)別類型的壞死細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)TUNEL檢測(cè)呈陽性。在需要嚴(yán)格判斷細(xì)胞凋亡的情況下，同時(shí)檢測(cè)多個(gè)凋亡指標(biāo)。
本試劑盒足夠檢測(cè)20個(gè)樣品。
包裝清單：
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
| C1091-1 | TdT酶 | 40μl |
| C1091-2 | Biotin-dUTP | 960μl |
| C1091-3 | TdT酶稀釋液（選用） | 500μl |
| C1091-4 | Streptavidin-HRP | 22μl |
| C1091-5 | Streptavidin-HRP稀釋液 | 1ml |
| C1091-6 | DAB顯色液A | 6ml |
| C1091-7 | DAB顯色液B | 6ml |
| C1091-8 | 標(biāo)記反應(yīng)終止液 | 6ml |
| — | 說明書 | 1份 |
保存條件：
-20℃保存。DAB顯色液A和DAB顯色液B需避光保存。
注意事項(xiàng)：
需自備用于洗滌細(xì)胞的PBS或HBSS，用于封片的抗熒光淬滅封片液（P0126）等適當(dāng)?shù)姆馄海糜诠潭ǖ?%多聚甲醛或向碧云天訂購(gòu)免疫染色固定液（P0098），同時(shí)需自備含0.1% Triton X-100的PBS或向碧云天訂購(gòu)免疫染色洗滌液（P0106）。 需自備過氧化氫，除石蠟切片外需自備甲醇。
如果用于石蠟切片的檢測(cè)，需自備蛋白酶K和二甲苯。蛋白酶K（ST533）可以向碧云天訂購(gòu)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
