Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit）是用FITC標(biāo)記的重組人Annexin V來檢測細(xì)胞凋亡時(shí)出現(xiàn)在細(xì)胞膜表面的磷酯酰*的一種細(xì)胞凋亡檢測試劑盒?？梢允褂昧魇郊?xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設(shè)備進(jìn)行檢測。
Annexin是一類廣泛分布于真核細(xì)胞細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子依賴的磷酯結(jié)合蛋白，參與細(xì)胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。但僅Annexin V被報(bào)道可以調(diào)控一些PKC的活性。
Annexin V選擇性結(jié)合磷酯酰*（phosphatidylserine，簡稱PS）。磷酯酰*主要分布在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，即與細(xì)胞漿相鄰的一側(cè)。在細(xì)胞發(fā)生凋亡的早期，不同類型的細(xì)胞都會(huì)把磷酯酰*外翻到細(xì)胞表面，即細(xì)胞膜外側(cè)。磷酯酰*暴露到細(xì)胞表面后會(huì)促進(jìn)凝血和炎癥反應(yīng)。而Annexin V和外翻到細(xì)胞表面的磷酯酰*結(jié)合后可以阻斷磷酯酰*的促凝血和促炎癥反應(yīng)活性。
用帶有綠色熒光的熒光探針FITC標(biāo)記的Annexin V，即Annexin V-FITC，就可以用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡非常簡單而直接地檢測到磷酯酰*的外翻這一細(xì)胞凋亡的重要特征。
本試劑盒還提供了碘化丙啶染色液，碘化丙啶可以染色壞死細(xì)胞或凋亡晚期喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，呈現(xiàn)紅色熒光。對于壞死細(xì)胞，由于細(xì)胞膜的完整性已經(jīng)喪失，Annexin V-FITC可以進(jìn)入到細(xì)胞漿內(nèi)，與位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷酯酰*結(jié)合，從而也使壞死細(xì)胞呈現(xiàn)綠色熒光。
綜上所述，參考下圖，用Annexin V-FITC和碘化丙啶染色后，正常的活細(xì)胞不被Annexin V-FITC和碘化丙啶染色（下圖左下角）；凋亡早期的細(xì)胞僅被Annexin V-FITC染色，碘化丙啶染色呈陰性（下圖右下角）；壞死細(xì)胞和凋亡晚期的細(xì)胞可以同時(shí)被Annexin V-FITC和碘化丙啶染色（下圖右上角）。下圖左上角出現(xiàn)的是許可范圍內(nèi)的檢測誤差。

包裝清單：

保存條件：
4℃保存，Annexin V-FITC和碘化丙啶染色液需避光保存，半年有效。為長期保存，可以把碘化丙啶染色液適當(dāng)分裝后-20℃保存，Annexin V-FITC結(jié)合液可以直接-20℃保存。
注意事項(xiàng)：
如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測，時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過程中使用了*，需注意設(shè)法去除殘留的*。殘留的*會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，zui終導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
需自備PBS。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。