程： :
方法編號：5022
1 適用范圍：適用于各類食品、原料和純凈水等樣品中大腸菌群的快速測定。
2 方法原理：將乳糖、顯色劑和選擇性培養(yǎng)基加載在紙片上，經培養(yǎng)后能夠在紙片上生長并發(fā)酵乳糖產酸的即為大腸菌群陽性，記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數(shù)，根據(jù)大腸菌群MPN表查出相應的大腸菌群數(shù)。
3方法特點：與國標法中的九管法相對應，將原來幾步的試驗簡化為一步，時間由78h縮短為24h以內，省去了制備培養(yǎng)基、消毒和培養(yǎng)器皿的清洗處理等大量輔助性工作，隨時可以打開包裝進行抽樣檢測。
4 操作方法
4.1樣品處理：無菌稱取樣品
4.2接種：選取兩個稀釋度進行接種，普通食品一般采用1：10和1：100這兩個稀釋度，飲料和飲用水采用原液和1：10兩個稀釋度。每份由三片大紙片（接10mL）,六片小紙片（接1mL）組成,大片每小袋二張疊放算作一片。用滅菌吸管吸取10 mL 1：10稀釋液加到含有大紙片的塑料袋中（相當于接樣品
4.3 培養(yǎng)：將接種好的紙片（可疊放）放入
5結果判斷與計數(shù)：若紙片變黃或在黃色背景上呈現(xiàn)紅色斑點為大腸菌群陽性紙片。紙片保持紫蘭色不變或在紫蘭色背景上呈現(xiàn)紅色斑點，但周圍沒有黃色均為大腸菌群陰性紙片。記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數(shù)，根據(jù)大腸菌群MPN表查出相應的大腸菌群數(shù)。如接種的*個稀釋度的稀釋液為原液，應將表上查出的結果除以10，以此類推。
6注意事項：如果樣品的酸堿度在pH7以下，應先用滅菌1mol/L氫氧化鈉（NaOH）調節(jié)溶液調至中性，避免因pH的原因導致的紙片變黃而影響結果觀察。
方法注解
1 檢測意義：大腸菌群是評價食品衛(wèi)生質量的重要指標之一，目前已被廣泛應用于食品衛(wèi)生工作中。大腸菌群多存在于溫血動物糞便、人類經?；顒拥膱鏊约坝屑S便污染的地方，大腸菌群數(shù)的高低，表明了食品及食品生產過程中受糞便污染的程度。大腸菌群計數(shù)紙片方法與傳統(tǒng)方法相比，節(jié)省了許多時間，省去了大量輔助性工作。
2 編寫說明
2.1目前，國外某一企業(yè)出品的大腸菌群計數(shù)紙片的檢測結果已與平板培養(yǎng)法相當，但產品售價相對較高。國內生產的此類產品在2007年經山東省疾病預防控制中心微生物所驗證時，如廣州天河綠洲生化研究中心的產品與平板法檢測結果的比率大約在90％左右，將其用于樣品中不得檢出大腸菌群的參數(shù)標準是可行的。在對樣品要求大腸菌群以cfu/mL.g（菌落形成單位）表述時，可參照菌落計數(shù)的方法進行。
2.2在一些實驗室中，使用國產大腸菌群檢測試劑盒的方法。中國疾病預防控制中心營養(yǎng)與食品安全所對天津諾凡公司出品的試劑盒與國標法進行了50份樣品的對比實驗，相關系數(shù)為r=0.992,p=0.000。兩種方法雖然都需要48h出結果，但試劑盒法具有易操作、省物力的優(yōu)點。
3 國家標準檢驗方法檢索
1. GB 4789.3—2010食品安全國家標準-食品微生物學檢驗-大腸菌群計數(shù)
