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方法編號：5022
1 適用范圍：適用于各類食品、原料和純凈水等樣品中大腸菌群的快速測定。
2 方法原理：將乳糖、顯色劑和選擇性培養(yǎng)基加載在紙片上，經(jīng)培養(yǎng)后能夠在紙片上生長并發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸的即為大腸菌群陽性，記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數(shù)，根據(jù)大腸菌群MPN表查出相應(yīng)的大腸菌群數(shù)。
3方法特點(diǎn)：與國標(biāo)法中的九管法相對應(yīng)，將原來幾步的試驗(yàn)簡化為一步，時間由78h縮短為24h以內(nèi)，省去了制備培養(yǎng)基、消毒和培養(yǎng)器皿的清洗處理等大量輔助性工作，隨時可以打開包裝進(jìn)行抽樣檢測。
4 操作方法
4.1樣品處理：無菌稱取樣品
4.2接種：選取兩個稀釋度進(jìn)行接種，普通食品一般采用1：10和1：100這兩個稀釋度，飲料和飲用水采用原液和1：10兩個稀釋度。每份由三片大紙片（接10mL）,六片小紙片（接1mL）組成,大片每小袋二張疊放算作一片。用滅菌吸管吸取10 mL 1：10稀釋液加到含有大紙片的塑料袋中（相當(dāng)于接樣品
4.3 培養(yǎng)：將接種好的紙片（可疊放）放入
5結(jié)果判斷與計數(shù)：若紙片變黃或在黃色背景上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)為大腸菌群陽性紙片。紙片保持紫蘭色不變或在紫蘭色背景上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)，但周圍沒有黃色均為大腸菌群陰性紙片。記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數(shù)，根據(jù)大腸菌群MPN表查出相應(yīng)的大腸菌群數(shù)。如接種的*個稀釋度的稀釋液為原液，應(yīng)將表上查出的結(jié)果除以10，以此類推。
6注意事項(xiàng)：如果樣品的酸堿度在pH7以下，應(yīng)先用滅菌1mol/L氫氧化鈉（NaOH）調(diào)節(jié)溶液調(diào)至中性，避免因pH的原因?qū)е碌募埰凕S而影響結(jié)果觀察。
方法注解
1 檢測意義：大腸菌群是評價食品衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標(biāo)之一，目前已被廣泛應(yīng)用于食品衛(wèi)生工作中。大腸菌群多存在于溫血動物糞便、人類經(jīng)?；顒拥膱鏊约坝屑S便污染的地方，大腸菌群數(shù)的高低，表明了食品及食品生產(chǎn)過程中受糞便污染的程度。大腸菌群計數(shù)紙片方法與傳統(tǒng)方法相比，節(jié)省了許多時間，省去了大量輔助性工作。
2 編寫說明
2.1目前，國外某一企業(yè)出品的大腸菌群計數(shù)紙片的檢測結(jié)果已與平板培養(yǎng)法相當(dāng)，但產(chǎn)品售價相對較高。國內(nèi)生產(chǎn)的此類產(chǎn)品在2007年經(jīng)山東省疾病預(yù)防控制中心微生物所驗(yàn)證時，如廣州天河綠洲生化研究中心的產(chǎn)品與平板法檢測結(jié)果的比率大約在90％左右，將其用于樣品中不得檢出大腸菌群的參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)是可行的。在對樣品要求大腸菌群以cfu/mL.g（菌落形成單位）表述時，可參照菌落計數(shù)的方法進(jìn)行。
2.2在一些實(shí)驗(yàn)室中，使用國產(chǎn)大腸菌群檢測試劑盒的方法。中國疾病預(yù)防控制中心營養(yǎng)與食品安全所對天津諾凡公司出品的試劑盒與國標(biāo)法進(jìn)行了50份樣品的對比實(shí)驗(yàn)，相關(guān)系數(shù)為r=0.992,p=0.000。兩種方法雖然都需要48h出結(jié)果，但試劑盒法具有易操作、省物力的優(yōu)點(diǎn)。
3 國家標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法檢索
1. GB 4789.3—2010食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)-食品微生物學(xué)檢驗(yàn)-大腸菌群計數(shù)
